仪器简介：

QuantStudioTM 3D数字PCR系统是一款基于芯片的仪器，它的第一代芯片能够在每次运行中最多产生20,000个0.8nL液滴，满足了目前大部分数字PCR应用的需求。采用数字PCR可实现灵敏且精确的绝对靶位点定量，无需使用参照或标准曲线，从而能够应用于新的领域。数字PCR可通过增加PCR反应的数量提高精确度，可以分析复杂的混合物，可对目标拷贝数进行精确的鉴定，分析微小的浓度差异，可用于稀有等位基因检测，基因表达绝对定量，病毒载量绝对定量，核酸标准品绝对定量，二代测序文库绝对定量。

仪器特点： 

1. 简单实验流程，手动操作只需要几分钟，在样品之间差异倍数不大的状态下，使用Digital PCR 更为准确。

2. 多色荧光系统FAM/VIC4.

3. 数字PCR, 不依赖于循环阈值，去确定目标的数量。所以, PCR效率在生物样品之间的差异不影响定量结果。

4. 在混杂的样品允许单个目标分子的检测，每孔信号与噪声的比例显着提高。

仪器信息：

仪器型号：QuantStudioTM 3D

生产产家：ThermoFisher

仪器价格：81.88万元

购置日期：2015.10

QuantStudio™ 3D 数字 PCR 系统操作规程

1. 按照实验需求配置DNA或者cDNA样品MIX.

2. 上样（如下图所示）

1) 打开芯片上样器，指示灯为淡蓝色灯光闪烁，为预热状态，芯片卡槽向上放置。

2) 如图卡住样品刷，用移液器吸取步骤1配置的样品MIX在样品刷上样区加15ul样品。

3) 芯片盖子撕去红色封膜，对准凹点卡在芯片上样器的后臂上方对应位置。

4) 待仪器指示灯为绿色灯光时，表明芯片模块加热至60℃就绪，按黑色按钮使得样品刷自动为芯片上样，上样结束后，立即往芯片上注油，覆盖芯片的黑色区域，盖上芯片盖子，按压约15秒。

5) 取下芯片，从右上孔中继续补油排气泡。（该步骤V2芯片需要打开胶条，补油后再封住；V1芯片直接补油后，该孔需要紫外交联剂封闭，并在芯片上样器的紫外区照射芯片）

3. PCR

把上样完毕的芯片，放置PCR仪上，按照实验需要，设定PCR条件，该步骤可同时反应24张芯片，约3小时。

4. 读取芯片结果

如图所示，读取芯片PCR后的数据，仪器可根据芯片上的ID来区分不同的芯片，读取的结果传输到U盘里，在QuantStudioTM 3D AnalysisSuite软件中进行数据处理。

注意事项：

未经培训一律不得上机操作，如需使用请联系平台工作人员。